1.荔枝AV污在线观看合成的基本原理?

荔枝AV污在线观看固相合成法是荔枝AV污在线观看合成化學的一個重大的突破。它的最大特點是不必純化中間產物，合成過程可以連續進行，進而為荔枝AV污在线观看合成的自動化奠定了基礎。目前全自動荔枝AV污在线观看的合成，基本都是固相合成。其基本過程如下：

基於Fmoc化學合成，先將所要合成的目標荔枝AV污在线观看的C-端荔枝视频黄下载的羧基以共價鍵形式與一個不溶性的高分子樹脂相連，然後以這一荔枝视频黄下载的氨基作為荔枝AV污在线观看合成的起點，同其它的荔枝视频黄下载已經活化的羧基作用形成肽鍵，不斷重複這一過程，即可得到荔枝AV污在线观看。根據荔枝AV污在线观看的荔枝视频黄下载組成不同，荔枝AV污在线观看後處理方式不同，純化方式也有差異。

2.荔枝AV污在线观看狀態是如何?如何保存儲存?

荔枝AV污在线观看提供的荔枝AV污在线观看是粉末狀，一般為灰白色，組成不同，荔枝AV污在线观看粉末的顏色有差異，荔枝AV污在线观看一般長期保存需要避光保存，並應保存在-20度，短期可以保存在4度。可以短時間的話是以室溫運輸。

3.如何溶解荔枝AV污在线观看?

因為荔枝AV污在线观看溶解比較複雜，通常是先取一點試驗，在沒有確定合適的溶劑前請勿全部溶解。

下列為選擇溶解溶劑的一般方法：

(1)判定荔枝AV污在线观看的電荷特定，設定酸性荔枝视频黄下载Asp(D),Glu(E)和C端COOH為-1；堿性荔枝视频黄下载Lys(K),Arg(R),His(H)及N端NH2為+1,其它荔枝视频黄下载的電荷為0。計算出淨電荷數。

(2)如果淨電荷數 >0，荔枝AV污在线观看為堿性，用水溶解：如果不溶解或溶解性不大，加入醋酸(10%以上)；如果荔枝AV污在线观看還不能溶解，加入少量TFA(25ul)溶解，然後加入500ul水稀釋。

(3)如果淨電荷數<0，荔枝AV污在线观看為酸性，用水溶解；如果不溶解或溶解性不大，加入氨水(25ul)溶解，然後加入500ul水稀釋。

(4)如果淨電荷數=0，荔枝AV污在线观看為中性，一般需要用有機溶劑如乙腈，甲醇或異丙醇，DMSO等溶解。還有人建議需要尿素來溶解疏水性很大的荔枝AV污在线观看。

4.非HPLC純化的荔枝AV污在线观看和經過HPLC純化的荔枝AV污在线观看有何區別?

粗品和脫鹽級別的荔枝AV污在线观看中雜質為荔枝AV污在线观看和非荔枝AV污在线观看類：如非全長荔枝AV污在线观看和荔枝AV污在线观看後處理的一些原料如DTT、TFA等；而經過HPLC純化的荔枝AV污在线观看，仍會有一些雜質存在，其中的雜質主要是短肽和微量TFA。

5.多長的荔枝AV污在线观看為合適?

荔枝AV污在线观看合成需要考慮荔枝AV污在线观看的長度，電荷，親疏水性等因素。長度越長，合成粗品的純度和產率都隨著降低，純化的難度和無法合成的幾率就會大些。當然荔枝AV污在线观看功能區的序列是無法改變的，但是為了荔枝AV污在线观看的順利合成，有時不得不在功能區的上下遊增加一些輔助荔枝视频黄下载，以改善荔枝AV污在线观看的溶解性和親疏水性。如果荔枝AV污在线观看太短，合成也可能有問題，主要問題是合成的荔枝AV污在线观看在後處理過程中有一定的難度，5肽以下的荔枝AV污在线观看，一般要有疏水的荔枝视频黄下载，否則後處理難度加大。15個荔枝视频黄下载殘基以下的荔枝AV污在线观看一般都可以得到滿意的產率和得率。
6.如何從荔枝AV污在线观看序列中判定荔枝AV污在线观看的溶解性?

(1)荔枝AV污在线观看中如果含有高比例的疏水性很強的荔枝视频黄下载如和Leu,Val,IIe,Met,Phe和Trp，荔枝AV污在线观看很難溶解於水性溶液中或根本不可能溶解。這些荔枝视频黄下载無論是純化或合成，都有可能有問題。

(2)一般情況下疏水性荔枝视频黄下载的比例<50%，不能連續5個連續aa為疏水性，帶電荷的荔枝视频黄下载的(正電荷K,R,H,N-terminus,負電荷D,E,C- terminus)的比例達到20%，在荔枝AV污在线观看的N或C短如果能增加極性荔枝视频黄下载，也可以改善溶解性。

7.為什麽含有Cys,Met,或Trp的荔枝AV污在线观看難合成?

含有Cys, Met,或Trp的荔枝AV污在线观看難以合成，同時難以獲得高純度的產品。主要因為這些基團不穩定，易氧化。這些荔枝AV污在线观看的使用和儲存都需要特別注意，避免反複開啟蓋子。

8.為什麽有些荔枝AV污在线观看的合成產率或純度會比較低?

荔枝AV污在线观看合成與引子合成有比較大的區別，不能合成的引子很少，但是不能合成的荔枝AV污在线观看經常有。如Val,Ile,Tyr,Phe,Trp,Leu,Gln,和Thr這些荔枝视频黄下载比鄰或重複時，荔枝AV污在线观看鏈在合成過程中不能完全舒展溶解，合成效率下降。以下幾種情形，合成效率和產物的純度都比較低，如：重複Pro,Ser-Ser，重複Asp，4個連續Gly等.

9.荔枝AV污在线观看是如何純化的?

荔枝AV污在线观看純化一般使用反相柱(如C8，C18等)，214nm。緩衝體係通常為含TFA的溶劑，pH 2.0 。Buffer A為含0.1%TFA in ddH2O，Buffer B為1%TFA/ACN/ pH 2.0。純化前用Buffer A溶解；如果溶解不好，用Buffer B溶解後，然後用Buffer A稀釋；對疏水性強的荔枝AV污在线观看，有時還需要加入少量的Formic Acid或醋酸。HPLC分析荔枝AV污在线观看粗產物，如果荔枝AV污在线观看不長(15aa以下)，一般會有主峰，主峰通常為全長產物；對於20aa以上的長肽，如果沒有主峰，HPLC需搭配Mass來判定分子量，進而確定哪個峰是所要合成的荔枝AV污在线观看.

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